細胞培養(yǎng)基類型及其特性

    培養(yǎng)基是既是培養(yǎng)細胞中供給細胞營養(yǎng)和促使細胞生殖增殖的基礎物質(zhì)，也是培養(yǎng)細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。培養(yǎng)基的種類很多，按其物質(zhì)狀態(tài)分為半固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基兩類；按其來源分為合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基。 

（1）合成培養(yǎng)基：合成培養(yǎng)基是根據(jù)細胞所需物質(zhì)的種類和數(shù)量嚴格配制而成的。內(nèi)含碳水化合物、氨基酸、脂類、無機鹽、維生素、微量無素和細胞生長因子等。單獨使用細胞雖有生存但不能很好的生長增殖。


（2）天然培養(yǎng)基：使用zui普遍的天然培養(yǎng)基是血清，基本以小牛血清zui普遍。血清由于含有多種細胞生長因子、促貼附因子及其多活性物質(zhì)。與合志培養(yǎng)基合用，能使細胞碩利增殖生長。常見使用zui為5-20%。

下面介紹一些常用培養(yǎng)基以及特性

1、RPMI-1640 Medium

    RPMI-1640廣泛應用于哺乳動物、特殊造血細胞、正常或惡性增生的白細胞，雜交瘤細胞的培養(yǎng)，是目前應用十分廣泛的培養(yǎng)基。主要用于懸浮細胞培養(yǎng)。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等均可參考使用。

2、Minimum Essential Medium（MEM）

    也稱zui低必需培養(yǎng)基，它僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。成分簡單，可廣泛適應各種已建成細胞系和不同地方的哺乳動物細胞類型的培養(yǎng)。MEM-Alpha一般用于培養(yǎng)一些難培養(yǎng)細胞類型，而其它沒有特殊之處的細胞株則幾乎均可采用MEM來培養(yǎng)。

3、DMEM-高糖（標準型）
    是一種應用十分廣泛的培養(yǎng)基，可用于許多哺乳動物細胞培養(yǎng),更適合高密度懸浮細胞培養(yǎng)。適用于附著性較差，但又不希望它脫離原來生長點的克隆培養(yǎng)，也可用于雜交瘤中骨髓瘤細胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細胞的培養(yǎng)。

4、DMEM-低糖（標準型）
    是一種應用十分廣泛的培養(yǎng)基，可用于許多哺乳動物細胞培養(yǎng)。低糖適于依賴性貼壁細胞培養(yǎng)，特別適用于生長速度快、附著性較差的腫瘤細胞培養(yǎng)。

5、DMEM/F12

    DMEM/F12培養(yǎng)基適于克隆密度的培養(yǎng)。F12培養(yǎng)基成分復雜，含有多種微量元素，和DMEM以1：1結(jié)合，稱為DMEM/F12培養(yǎng)基（DME/F12medium），作為開發(fā)無血清配方的基礎，以利用F12含有較豐富的成分和DMEM含有較高濃度的營養(yǎng)成分為優(yōu)點。該培養(yǎng)基適用于血清含量較低條件下哺乳動物細胞培養(yǎng)。為了增強該培養(yǎng)基的緩沖能力，改良之一是在DMEM/F12（1：1）中加入15mMHEPES緩沖液。

6、McCoy’s 

    McCoy’s  Medium 主要為肉瘤細胞的培養(yǎng)所設計，可支持多種（如骨髓、皮膚、肺和脾臟等）的原代移植物的生長，除適于一般的原代細胞培養(yǎng)外，主要用于作組織活檢培養(yǎng)、一些淋巴細胞培養(yǎng)以及一些難培養(yǎng)細胞的生長支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纖維細胞、人淋巴細胞、HT-29、BHL-100等上皮細胞。

7、Iscove’s Modified Dulbecco Medium （IMDM）

    Guilber 和Iscove將Dulbecco’Medium 改良為 Iscove’s Medium，用于培養(yǎng)紅細胞和巨噬細胞前體。此種培養(yǎng)液含有硒、額外的氨基酸和維生素、丙酮酸鈉和HEPES。并用硝酸鉀取代了硝酸鐵。IMDM還能夠促進小鼠B淋巴細胞，LPS刺激的B細胞，骨髓造血細胞，T細胞和淋巴瘤細胞的生長。IMDM為營養(yǎng)非常豐富的培養(yǎng)液，因此可以用于高密度細胞的快速增殖培養(yǎng)。

8、M-199 Medium

    1950年，Morgan成功研制出具有確定化學成分的細胞培養(yǎng)液，即M-199，主要用于雞胚成纖維細胞培養(yǎng)。此培養(yǎng)液必須輔以血清才能支持長期培養(yǎng)。M-199可用于培養(yǎng)多種種屬來源的細胞，并能培養(yǎng)轉(zhuǎn)染的細胞。

9、Leibovitz Medium （L-15）

    L-15培養(yǎng)液適用于快速增殖瘤細胞的培養(yǎng)，用于在CO2缺乏的情況下培養(yǎng)腫瘤細胞株。此培養(yǎng)液采用磷酸鹽緩沖體系，氨基酸組成進一步改良，并由半乳糖替代了葡萄糖。

10、Ham’s F-10培養(yǎng)基：適應小鼠細胞、人類二倍體的培養(yǎng)。

11、Ham’s F-12培養(yǎng)基：可以在加入很少血清的情況下應用，特別適合單細胞培養(yǎng)和克隆化培養(yǎng)，是無血清培養(yǎng)中常用的基礎培養(yǎng)液。

12、William’s Medium E：用于大鼠肝上皮細胞的長期細胞培養(yǎng)。

13、MCDB 131 培養(yǎng)液：用于培養(yǎng)內(nèi)皮細胞。

14、Opti-MEM I Reduced Serum Media：用于培養(yǎng)造血細胞。

15、植物血凝素（PHA）：增加細胞轉(zhuǎn)化和DNA合成。